تشخیص آنتی بادی علیه پروتئین هانتینگتین

به گزارش واحد ژنتیک پایگاه اطلاع رسانی علوم آزمایشگاهی ایران، بیماری هانتینگتون (HD) یک اختلال نورودژنراتیو اتوزومال غالب است که با گسترش پاتولوژیک CAG بیش از 35 تکرار در Exon1 ژن هانتینگتین (HTT) تعریف می شود. این منجر به تولید پروتئینی می شود که حاوی پلی گلوتامین منبسط شده (polyQ) به نام هانتینگتین جهش یافته (mHTT) است. mHTT را می توان به عنوان یک پروتئین تمام قد یا یک قطعه Exon1 در بدن یافت. در حالی که سهم دقیق اشکال مختلف mHTT در آسیب شناسی نامشخص است، مشخص است که با گذشت زمان، وجود mHTT در سلول ها باعث اختلال در عملکرد و مرگ می شود که همه این موارد منجر به بیان بالینی و ایجاد ویژگی های آشکار HD می شود. در حالی که mHTT به طور کلاسیک برای هدایت آسیب شناسی از درون سیستم عصبی مرکزی (CNS) توصیف می شود، در همه انواع سلول بیان می شود و می تواند در مایع مغزی نخاعی (CSF)، پلاسما و همچنین در فضای خارج سلولی یا ماتریکس یافت شود.

چندین ناهنجاری سیستمیک در HD توصیف شده است، از جمله تغییرات اولیه در سیستم ایمنی. در CNS، این توسط یک پاسخ گلیال برجسته مشاهده می شود، در حالی که در محیط، افزایش سطح سیتوکین های پیش التهابی و کموکاین های مرتبط با تغییرات مونوسیت و ماکروفاژ در گردش قابل اندازه گیری است. وجود mHTT در مونوسیت های محیطی و لنفوسیت های T برای ارتباط با مرحله بیماری و پیشرفت در بیماران پیشنهاد شده است. شواهد بیشتری از برهمکنش بین mHTT و سیستم ایمنی از یک مطالعه بدست می آید که نشان می دهد تزریق طولانی مدت فیبریل های مصنوعی mHTT یا HTTExon1 مجموعه های مرتبط با HD از پروتئین قطعه HTTExon1 انسانی، به ورید دم موش ها منجر به تولید آنتی بادی علیه فرم تزریقی HTT شد. پاسخ آنتی بادی تولید شده، به ویژه پس از تلقیح فیبرهای mHTTExon1 قوی بود. این یافته ها نشان می دهد که سیستم ایمنی می تواند mHTT را به عنوان ایمنی زا تشخیص دهد و یک پاسخ هدفمند آنتی بادی علیه آن، حداقل در موش، ایجاد کند. با توجه به اختلال ایمنی مرتبط با HD و تولید آنتی بادی ها علیه mHTT پس از تزریق محیطی در موش ها یک پلت فرم غربالگری پلاسمای حساس شامل یک ایمونوسوربنت غیرمستقیم مرتبط با آنزیم و سنجش وسترن بلات با استفاده از اشکال مختلف HTT برای تعیین اینکه آیا پاسخ اتوآنتی بادی در HD رخ می دهد یا خیر، ایجاد شد.

نتایج مطالعه

این مطالعه شواهدی ارائه می دهد که آنتی بادی هایی که اشکال مختلف HTTیاmHTT را تشخیص می دهند در پلاسمای انسان وجود دارد. با استفاده از اشکال متعدد HTTیاmHTT، علاوه بر این می توان حضور آنتی بادی ها را در پلاسمای انسانی خالص شده با استفاده از روش های ELISA و Western blot ایجاد و مشخص کرد. داده های ارائه شده مربوط به آنتی بادی های خودکار HTT IgG است. در انسان، اتوآنتی بادی ها از ایزوتیپ های IgM و IgG هستند. قبلاً تصور می شد که بیشتر اتوآنتی بادی ها IgM هستند، اما مطالعه اضافی برجستگی ایزوتیپ های IgG را برجسته کرده است و نشان می دهد که تعداد آنها تحت تأثیر سن، جنسیت و بیماری است. در پرتو این یافته ها، مطالعه بر روی آنتی بادی های با میل ترکیبی بالا و با کمی کردن حضور آنتی بادی های auto-IgG در HD متمرکز می شود. بر اساس داده های بدست آمده، اپی توپ های مورد علاقه آنتی بادی ها با شدت بیماری و سن تغییر می کند. به طور خاص، افزایش گذرا در آنتی بادی ها علیه mHTT یا HTTExon1 را در بیماران مرحله 1-2 نشان می دهد که با افزایش مداوم آنتی بادی های تشخیص دهنده mHTT اندازه گیری شده توسط وسترن بلات در سراسر بیماری مقایسه می شود.